2 недостатка ПЦР на туберкулез: анализ крови для диагностики

Как происходит процесс выявления бактерий

Если описать кратко, то процесс заключается в выделении части ДНК. Применение современных методов генной инженерии позволяет определить вид микроорганизма. Причем материала для анализа нужно небольшое количество.

Технически это очень сложная процедура, но она занимает меньше времени, чем классические бактериологические исследования. Возбудителей не нужно выделять из биоматериала, нет нужды растить их в течение нескольких недель. В день сдачи пациент уже может узнать результат своего анализа.

Весь процесс ПЦР протекает поэтапно:

1. Ведется работа с первичной формой ДНК, которая при высокой температуре, близкой к 100 градусам, делится на две цепочки.
2. Температура понижается, нити соединяются с фрагментами нуклеиновой кислоты – праймером.
3. Происходит элонгация – синтез молекулярной структуры.

Весь сеанс состоит примерно из тридцати таких процедур, повторяющихся циклом как цепная реакция. Это необходимо для создания того количества клеток, при котором полученные бактерии станут распознаваемы.

Где можно сделать подобные анализы

Назревает, конечно, вопрос: где же можно сдать такие анализы? Например, практически в каждом городе есть лаборатория ИНВИТРО, которая занимается подобного рода анализами.

Качество тут считается международного уровня, подтверждено сертификатами. Контроль качества происходит по международным правилам, которые приняты во всей Европе.

Эта лаборатория находится на уровне топовых международных медицинских компаний, которые являются первыми на мировом рынке. Лаборатория является лидером диагностирования на территории страны.

Зайдя на сайт этой компании можно увидеть фото со зданием, который называется главным офисом. Также там размещены цены на каждый анализ, а также на анализ крови по данной тематике.

Как видите, кроме манту можно сделать как минимум две процедуры, которые отлично подходят для выявления болезни, или способности организму бороться с инфекцией.

Это своеобразная проверка способностей организма. Несмотря на то, что манту считают обязательной прививкой, сейчас родители ищут очень много обходных путей в силу разных причин: боятся за реакцию организма на манту, а также просто хотят диагностики, которая была бы более точной.

В этом нет ничего страшного, ведь здоровье и жизнь детей всегда должна быть на первом месте. Поэтому, можно сделать анализ крови на туберкулез вместо манту ребенку, а также ПЦР диагностика туберкулеза, которые могут использоваться даже детьми.

И то, и другое отличается от манту тем, что является более точным. Преимущества этих методов в том, что их можно применять в любом возрасте, поэтому для деток это будет сделать не проблема.

Анализ крови, конечно относится к более общему описанию состояния организма и даст возможность исследовать его на разные болезни, если родитель того захочет.

Выбирать ту, или иную методику конечно же, родителю. Это будет зависеть от целей, которые они преследуют. Если просто нужна справка для учебного заведения, то подойдет анализ крови.

Но он может быть не точный, если ребенку делали БЦЖ. Если же хочется узнать реальные результаты без риска лжи, то ПЦР, хотя и дорого.

Но не стоит отрицать того, что важнее всего здоровье ребенка, прежде всего нужно просто обратить внимание и первые признаки болезни никогда не пройдут не замеченными. .

Подготовка к процедуре

Перед взятием анализа пациенту необходимо провести подготовительные мероприятия. Они зависят от того, какой материал будет сдаваться:

1. Если необходимо сдать кровь, должна быть подготовлена стерильная пробирка. В нее добавляется антикоагулянт – специальный раствор, препятствующий свертыванию крови. В него помещается собранный материал и осторожно смешивается. Кровь собирают одноразовым шприцем из вены.
2. Процедура проводится утром натощак. Хранится кровь в холодильнике не более пяти часов. Если пренебречь этим правилом, результаты анализа могут быть неточными.
3. За неделю до сдачи биоматериала следует прекратить прием любых лекарств.
4. Нельзя сдавать кровь после приема алкогольных напитков.
5. При наличии хронических инфекционных или воспалительных заболеваний процедура переносится до тех пор, пока человек полностью не выздоровеет.

Обязательно во время процедуры необходимо соблюдать по возможности максимальную стерильность

Поэтому важно сдавать анализы только в проверенных клиниках под руководством опытного специалиста. Следует помнить, что минимальное попадание посторонних микроорганизмов может дать неправильный результат

Во избежание этого, доктор может назначить повторное исследование.

Чем можно заменить ПЦР-диагностику туберкулеза

Другие виды обследования не изжили себя, а продолжают использоваться. Их применяют в тех случаях, когда нет возможности выполнить ПЦР на туберкулез. К тому же современный метод неидеален, иногда его показатели подвергаются сомнению и требуют перепроверки.

Определить наличие туберкулеза у человека помогают следующие способы:

• туберкулинодиагностика (Манту);
• флюорография;
• тестирование биологического материала на флору;
• рентген легких.

Эти исследования являются бесплатными и доступными для каждого. Но у них есть свои недостатки:

• Тест на туберкулез вызывает аллергию. Противопоказан при заболеваниях кожи.
• Рентгенологические исследования сопровождаются облучением, что неприменимо к детям, людям с иммунодефицитом и беременным женщинам.
• Бактериологические анализы занимают гораздо большее количество времени, результата можно ждать до месяца.

Альтернативные варианты не являются гарантией стопроцентно правильного заключения. Они чаще всего используются в профилактических целях. Диагностирование туберкулеза методом ПЦР дает наиболее достоверную информацию. Если есть возможность, то лучше воспользоваться именно им.

Кому показан анализ

Большинство больных направляются на ПЦР диагностику в спорных и сложных случаях туберкулеза. Когда медицинские работники выдают направление на исследование?

1. Если произошел контакт с человеком, у которого достоверно поставлен диагноз туберкулёза, но обычными способами диагностику сложно провести;
2. При тех обстоятельствах, если больного предоставить в поликлинику невозможно для рентгенографии или других исследований. В такой ситуации его проще обследовать при помощи полимерного метода. Анализ мокроты просто доставляется в лабораторию в специальной таре, а результат становится известен спустя несколько часов;
3. Перед операцией бывает необходимо срочно определить болен ли пациент туберкулезом, в этом случае показано проведение ПЦР;
4. Из-за безопасности способа, можно проводить обследование беременной женщины или ребёнка, при этом не создается дополнительная рентген-нагрузка;
5. Сомнительные результаты теста Манту.

Каждый желающий может пройти обследование платно, если туберкулез не подтвердился при помощи бактериологии и рентгеноскопии. Так случается, если очаг в лёгочной ткани невидим на Rg- снимке в прямой проекции, а пациент не смог собрать мокроту правильно, но человека беспокоят.

Современная ПЦ реакция для диагностики – это залог успешного лечения, в результате которого распространенность заболевания снижается. Традиционные способы определения недугов не всегда дают желаемый эффект.

Так ПЦР анализ на сегодняшний день стал одним из достоверных и безопасных методов диагностирования на ранних сроках развития болезни.

Как проводится

Забор слюны

ПЦР анализ проводится с помощью забора биологической жидкости человека. Чаще всего используется кровь. Но также могут быть использованы:

• мокрота;
• слизь;
• слюна;
• содержимое желудка.

Перед процедурой специалист подготавливает предметное стекло, нанося на его поверхность специальный раствор для предотвращения свертываемости крови. Затем обрабатывает место прокола на пальце с помощью ватного тампона, смоченного в спиртовом растворе.

Первую каплю крови убирают ватой, а остальную в нужном количестве набирают в пробирку. Место прокола снова обрабатывают с помощь ватки и спиртового раствора.

Затем специалист наносит на предметное стекло небольшое количество крови. И направляет анализ в лабораторию. Там клетки отделяют от плазмы и рассматривают материал под микроскопом с целью выявления наличия возбудителя.

Заключительный этап процедуры проводится для выявления наличия туберкулеза. Для этого к осадочному составу добавляют специальные вещества, которые создают нужную температуру. В результате получается обновленный ДНК-материал.

Данная методика диагностирования позволяет выявить туберкулез и определить верную методику терапии. Анализ проводится как детям, так и взрослым и незаменим для быстрого выявления заболевания. На основе результатов удается установить источник заражения. ПЦР проводится вместо пробы Манту в экстренных случаях, когда у врача появляются подозрения на значительное поражение легких.

Дополнительные исследования общий анализ крови

Общий анализ крови при туберкулезе используется в качестве дополнительной диагностической методики, так как она может показать только воспалительный процесс в организме, характерный для множества других заболеваний. В результатах ОАК отмечаются следующие отклонения:

• увеличение скорости оседания эритроцитов (СОЭ) до 50 Г/л и больше (норма у здорового человека до 20);
• значительное повышение концентрации лейкоцитов (норма — 3,2-10,6×109/л);
• снижение уровня лимфоцитов (норма — 30-40%);
• сдвиг лейкоцитарной формулы за счет увеличения количества эозинофилов (норма — 1-6%).

В некоторых случаях показатели ОАК при туберкулезе остаются в пределах нормы, поэтому больным рекомендуется комплексное обследование.

Важно. Отклонения от нормы, которые можно выявить в ОАК при туберкулезе, характерны для пневмонии и онкологических заболеваний дыхательной системы, поэтому больному необходимо комплексное обследование

В анализе крови у детей при туберкулезе отмечаются те же изменения, что и у взрослых с той лишь разницей, что нормальные значения для пациентов разного возраста могут значительно отличаться. Так, норма содержания лейкоцитов для детей до 12 лет составляет 4-5,2×109/л, лимфоцитов — 30-50%, СОЭ — 1-10.

Преимущества метода

Данный анализ уже через несколько часов определяет наличие возбудителя. Кроме того, если в организме будет присутствовать малое количество бактерий, данный метод все равно сможет их выявить.

Основным достоинством теста ПЦР являются следующие положительные моменты:

1. Болезнь выявляется в 100% случаев.
2. Специфичность ДНК МБТ высока.
3. Анализ выявляет возбудителя за 4-4,5 часа.
4. Успешно диагностируется туберкулез легких, с чем не могут справиться другие методы.
5. Возможность выявления определенного фрагмента, который содержится в данном возбудителе.

Полимерная цепная реакция дает возможность не только своевременно выявить возбудителя и начать лечение больного, она позволяет вовремя изолировать человека от общества в случае заражения. Палочка Коха — возбудитель туберкулеза — может находиться в организме где угодно. И лишь ПЦР анализ позволяет выявить ее в месте нахождения.

Исследование ПЦР также дает возможность подобрать лекарственный препарат в зависимости от чувствительности микроорганизмов.

Симптомы туберкулеза и его профилактика

Специалисты утверждает, что туберкулезом страдают около 30% всего населения.

Самый высокий процент заболевания развит в малоразвитых странах. Это чаще всего происходит в результате пониженного иммунитета у человека.

Заболевание является одним из самых старых. Эта болезнь может находиться в оболочки мозга, в пищевом тракте, на суставах и позвоночнике, в мочевыделительной системе и небольшими участками на коже человека.

Специалисты легче всего определяют пораженную болезнью кожу. На участке возникают небольшие уплотнения, которые со временем увеличиваются в размере, прорываются наружу вместе с беловатой жидкостью.

Возбудитель туберкулеза чаще всего можно подцепить при разговоре с больным человеком, при его кашле или чихании. Обычно заболевание протекает без симптомов или имеет открытую форму, но ПЦР дает возможность выявить его на ранних этапах и в экстренных случаях.

Симптомы заболевания: продолжительный мокрый кашель, лихорадка, озноб, обильное потоотделение по ночам, резкая потеря в весе, чувство усталости и слабости.

Открытая форма заболевания является самой опасной. Человек, болеющий туберкулезом способен заразить здоровых людей.

Самым главным признаком болезни легких является кровохарканье. Оно возникает при любой форме заболевания.

В некоторых ситуациях это может перейти в кровотечение легких человека. Это очень опасно и требует срочное медицинское вмешательство.

Для профилактики и распознавания туберкулеза специалисты назначают: пробу – , экспертизу биологического материала, флюорографию, рентген и анализ крови, мокроты или слюны.

Стоимость анализов в разных центрах

Цена процедуры может отличаться в зависимости от медицинского центра, где она проводится. Подробнее в нижерасположенной таблице.

Метод ПЦР для анализа на туберкулез сравнительно новый, и многие пациенты с ним еще не знакомы. В большинстве случаев больные предпочитают Манту и флюорографию. Но, как показывает практика, этот способ диагностики более эффективный и в конечном итоге полностью себя окупает.

Отсутствие противопоказаний и быстрота выполнения делает его привлекательным по сравнению с другими анализами. Медицина не стоит на месте и этот метод с каждым разом усовершенствуется и становится все более надежным.

В чем недостатки

Этот метод диагностики является скорее исключительным, чем закономерным, для этого имеются причины

В первую очередь во внимание берётся дороговизна метода. Оборудование дорого стоит, государственные поликлиники не имеют возможности его приобрести из-за высокой цены, но большинство платных лабораторий оборудование имеют, анализ в них делается

Существующие недостатки:

• Метод обнаруживает убитые бактерии, которые погибли после лечения, при этом ПЦР показывает положительный результат. Сразу после химиотерапии проводить исследование нет смысла, так как результат будет недостоверным;
• Туберкулезные микобактерии подвержены мутации, что приводит к неэффективности способа, при этом нить ДНК не может последовательно синтезироваться.

Среда для исследования должна тщательно выбираться, взятие крови или мочи происходит только в том случае, если есть подозрение на заражение. Нельзя взять мокроту для исследования, если подозревается туберкулез костей. В этой ситуации диагностика будет неверной.

Кровь и моча больного туберкулезом для изучения на ПЦР берется редко, выявление болезни таким способом сомнительно. В этих биосредах возбудитель определяется только при сепсисе, либо в случае . Локальные формы встречаются наиболее часто, при них кровь и моча могут оставаться без изменений. Чаще всего для изучения берется мокрота.

Подготовка к сдаче анализов на ПЦР

Внимание, нужна правильная подготовка слюны к ПЦР. Если не соблюдать все предписания, то анализ может быть ложноположительным

Перед сдачей анализа за 12 часов запрещается курить, принимать пищу и лекарства, а так же употреблять алкоголь. Запрещено чистить зубы, нельзя пользоваться ополаскивателем, освежителем для рта и зубной нитью.

Запрещено пользоваться губной помадой и вступать в интимные отношения. Разрешено ополаскивать рот простой кипяченой водой;

Данное обследование поможет выявить: герпес, хламидии, туберкулез, возбудители пневмонии, онковирусы, бароллеоз, мононуклеоз, ВИЧ, гепатит всех видов, краснуху.

Анализ на микобактерии в основном проводят в спорных случаях, а именно если тяжело поставить диагноз или был контакт с больным туберкулеза, перед началом операции, для обнаружения заболевания. Используют для обследования беременной женщине, так как такой метод самый безопасный для матери и плода.

Иногда анализ выполняют в частной клинике, так как пациент не придерживался правил для сдачи анализа, но при этом его беспокоят все симптомы. Анализ могут выполнить, когда специалисты не уверены после проведения пробы Манту или пациентом является ребенок.

Преимущества метода

ПЦР-диагностика туберкулеза завоевала популярность по многим причинам. Она имеет массу достоинств, среди которых:

1. Точность исследования. При проведении анализа с соблюдением технологии удается выявить бактерии, даже если они присутствуют в малом количестве.
2. Быстрый результат. Весь процесс от сбора материала до готового заключения занимает около 5 часов. Если сравнить с посевом, его приходится ждать до нескольких недель.
3. Полная безопасность для человека, в отличие от флюорографии с ее облучением.
4. Используется любой жидкий биоматериал. Для осуществления ПЦР при туберкулезе легких наиболее точную информацию дает мокрота, при туберкулезном менингите берется образец из спинного мозга. Анализ крови помогает выявить местные очаги инфекции.
5. Проверяется чувствительность бактерий к антибиотикам. Это позволяет назначить правильное лечение.
6. Ранняя диагностика. Узнать о наличии заболевания можно до появления ее симптомов.

Кроме положительных моментов есть и недостатки. Главный из них – это цена. Анализ ПЦР не из дешевых, что связано с использованием дорогого оборудования. Еще один минус – необходимость выжидать время для проведения повторного теста после курса лечения от туберкулеза. Иногда результат проверки получается ложноположительным. Такое бывает из-за мутации бактерий.

Как проводится ПЦР на туберкулз

Особенности забора материала:

1. Анализ крови обязательно берётся у пациента утром из вены в лаборатории.
2. Для сдачи мокроты на слизь нужна обязательно из гортани и желательно без большого количества слюны. Её пациент должен сплюнуть в специальный стерильный контейнер, после чего сдать на исследование.
3. Врачи берут соскоб специальным инструментом со слизистой щеки.
4. Моча сдаётся в специальном контейнере. Берётся средняя часть утренней порции.

Молекулярно генетическая реакция посредством ПЦР проводится с помощью специального прибора, который называется амплификатор. Для изучения необходимы сегменты ДНК, с которых начинается синтез молекул.

Методика состоит из четырёх этапов:

1. Изначально собирается необходимый биоматериал для исследования (кровь, мокрота и слюна).
2. Затем образец прогревается при температуре до 98 градусов и не более двух минут. Таким образом, разрушается первичная форма генетики ДНК и образуются две цепочки.
3. Далее идёт отжиг или понижение температуры, за счёт чего праймер связывается с нитью ДНК.
4. Последний этап носит название элонгация. Это синтез молекул, который приводит к конечному результату.

Необходимо провести 25–30 подобных циклов, чтобы получить определённое количество копий ДНК вирусов. По ним и определяются возбудители заболевания.

Информативность и достоверность ПЦР диагностики составляет 100%.

Недостатки ПЦР при диагностике туберкулза

В наше время такая диагностика скорее редкость, чем закономерность. И для этого есть основания.

1. Это дорогой метод исследования. Во многих поликлиниках оборудование для проведения ПЦР отсутствует из-за высокой его стоимости, но в платных лабораториях анализ всё-таки можно сделать.
2. Сразу после проведённого лечения мёртвые микобактерии или живые в незначительном количестве могут ещё присутствовать в организме человека (при проведении ПЦР диагностики результат будет положительным), поэтому в это время метод будет недостоверным, проводить его нет смысла.
3. Мутации микобактерий приводят к неэффективности ПЦР — не может синтезироваться нормальная последовательность нити ДНК.
4. Нужно правильно выбирать среду для исследования, кровь берут только при подозрении на её заражение (сепсис), нет необходимости брать мокроту если под вопросом стоит туберкулёз органов нервной системы. В таком случае ПЦР не сможет обнаружить возбудителя и диагностика будет неинформативной.

Преимущества и недостатки медицинских анализов для определения туберкулеза

ПЦР является самым востребованным и эффективным способом определения заболевания.

Его самое большое отличие от других исследований – это быстрый и точный результат.

Плюсом этого медицинского обследования является то, что его можно проводить для урологических, гинекологических, онкологических, инфекционных, гематологических, пульмонологических, гастроэнтерологических и других исследований.

Главным преимуществом такого медицинского исследования является, что анализ крови, мокроты и слюны готовы в короткие сроки (для выявления заболевания потребуется от 5 часов). Такое медицинское обследование позволяет провести анализы, когда под запретом или недоступные некоторые способы изучения болезни. Отлично подходит для выявления рецидива у человека

Благодаря такому анализу появилась возможность проведения исследований для любой биологической среды. Он разрешен для взятия материала у детей. ПЦР дает возможность выявить возбудителя на любом этапе заболевания. Благодаря его высокой чувствительности, можно найти микробы даже если присутствует всего несколько бактерий.

Метод ПЦР расширяет свои возможности. Его так же используют для определения отцовства, для изготовления новых генов, мутаций, для скрещивания элементов ДНК и так далее.

Недостатки данного исследования — это дорогостоящий способ обследования.

После медицинского лечения анализ крови может показать присутствие живых или мертвых возбудителей в небольших количествах, после проведения медицинского обследования, он даст положительный результат.

Бактерии и микробы могут подвергнуться мутации, после чего ПЦР не сможет их определить и выявить, поэтому только специалист может назначить исследование необходимой среды, иначе такое медицинское обследование будет безрезультатным.

После сдачи анализов бывает отрицательный результат, но это никак не исключает возможность человека быть зараженным туберкулезом. Такое медицинское обследование проводят для больных с тяжелой стадией заболевания легких, когда любые другие исследования не дают точных результатов. ПЦР будет полезна для людей с легочным и внелегочным туберкулезом.

К сожалению, медицинское оборудование для выявления возбудителей туберкулеза очень дорого стоит.

Государственные больницы и поликлиники не могут его себе этого позволить, но платные клиники принимают анализы пациентов и в короткие сроки предоставляют готовый результат.

Похожие статьи

Особенности туберкулеза у детей и необходимость ПЦР

Ребенка следует особенно оберегать от заболевания – туберкулезная инфекция может нанести серьезный вред организму с еще не совсем сформировавшимся иммунитетом.

После попадания палочки Коха в детский организм развитие заболевания проходит такие стадии:

• Латентная. Продолжается до года, не выдавая себя никакими симптомами.
• Интоксикация. Сказывается на общем состоянии здоровья. Появляется слабость, апатия, отсутствие аппетита, сонливость и снижение работоспособности. Постоянно немного повышена температура.
• Первичная форма заболевания. Туберкулез локализуется, образуя очаг заболевания. У ребенка возникает кашель, одышка, головная боль, увеличение лимфоузлов.
• Туберкулезный бронхоаденит. Симптомами являются боль в лопатках, кашель с разной тональностью звука, хрипы.

Обычно для выявления инфекции под кожу ребенка вводится туберкулин. Если к этому виду обследования имеются противопоказания, то ПЦР на туберкулез – незаменимый вариант для диагностики. Дети обычно сдают анализ крови, но при необходимости собирается и мокрота. При малейшем подозрении на наличие туберкулез проводятся дополнительные исследования, чтобы убедиться в положительном результате и сразу начать лечение на ранней стадии, не допуская развития болезни.

Современные методы исследования всегда быстрее и надежнее. Жаль, что из-за дорого оборудования сделать такие анализы есть возможность не во всех медицинских учреждениях и населенных пунктах. Каким способом провести обследование обычно выбирает врач, но и у пациента есть право выбора. Если вам приходилось сдавать анализ ПЦР, расскажите об этом в комментариях. Если статья оказалась для вас полезной, поделитесь ей в соцсетях – возможно, она поможет вашим друзьям.

Виды анализов ПЦР на туберкулз

Выбор биоматериала для обследования на туберкулёз должен назначаться в индивидуальном порядке.

Для диагностики ПЦР на туберкулёз могут взять анализы:

• крови;
• слюны (мазок);
• мокроты;
• мочи.

Анализ крови

Особенности анализа крови на туберкулёз:

1. Проводят в тех случаях, когда другие диагностики не подходят или противопоказаны. Например, для постановки верного диагноза требуется делать не один рентген-снимок. Для организма излишнее облучение небезопасно, поэтому взять кровь у пациента гораздо проще.
2. Также врач может дать направление на кровь при получении спорных результатов после флюорографии.

Анализ слюны

Особенности:

1. Анализ слюны менее популярен и информативен, чем другие исследования, так как туберкулёз не поражает слюнные железы. Поэтому в большинстве случаев результат будет отрицательным.
2. Метод направлен на выявление лёгочных и внелёгочных форм.
3. Если под действием реагента цвет образца не меняется, это означает, что возбудителей нет. Если все же возникает подозрение на болезнь, то проводится дополнительный комплекс анализов.

Анализ мокроты

Анализ мокроты является наиболее информативным для выявления возбудителей туберкулёза. Пробы берут несколько раз, как правило, трёх раз достаточно. Это исключает возможность ошибок при получении некачественного материала.

Если человек заражён туберкулёзом, то вместе с кашлем будет выделяться мокрота в небольших количествах. У больных в запущенной стадии заболевания слизь будет выделяться с кровянистыми вкраплениями.

Не рекомендуется брать мокроту для обследования, если у пациента подозрения на туберкулёз костей или нервной системы.

Анализ мочи

Анализ мочи – это один из способов выявления внелёгочных форм заболевания: туберкулёз почек и мочеполовой системы.

При лёгочной форме заболевания общий анализ мочи практически неинформативен, так как не наблюдается ярко выраженных патологических изменений.

Из видео вы узнаете какой врач ставит диагноз туберкулёз. Снято каналом tuberculum. ru.

Что такое анализ ПЦР

Все живые микроорганизмы, включая вирусы и бактерии, содержат в своей структуре молекулы РНК и ДНК. Выделив эти кислоты, можно с большой достоверностью сказать, какие чужеродные агенты присутствуют в крови человека, и поставить точный диагноз.

Суть метода ПЦР заключается в особой обработке образцов биологических жидкостей, в результате чего можно определить, к какому виду относятся присутствующие в нем микроорганизмы.

К содержанию ↑

Анализ ПЦР на туберкулез: показания, преимущества и недостатки

Методика ПЦР применяется у людей с тяжелыми поражениями легких в тех случаях и респираторными проявлениями (сильный кашель, кровохаркание), когда точно диагностировать болезнь по клиническим симптомам невозможно.

Рекомендуется пройти исследование и после непосредственного контакта с носителем заболевания. В число преимуществ, которыми он обладает, входят:

• скорость выполнения — для получения результата не нужно выращивать культуру возбудителя или проводить другие сложные процедуры;
• высокая информативность — при диагностике туберкулеза точность анализа достигает 90% и выше;
• высокая чувствительность и специфичность — для выявления возбудителей болезни в материале может содержаться всего одна клетка вируса;
• универсальность — для анализа подходят практически любые биологические жидкости: мокрота, кровь, смывы бронхов.

Для сравнения: точность микроскопии мазков мокроты, которая используется для выявления туберкулеза, составляет всего 40-50%, а при низком количестве возбудителей снижается до 10% и меньше. Культуральные исследования мокроты более информативны, но для получения результатов требуется от 2 до 8 недель.

Можно использовать ПЦР на туберкулез вместо Манту, если у человека имеются какие-либо противопоказания к пробе.

К недостаткам методики относится риск получения ложноотрицательного результата. Иными словами, отсутствие в мокроте, крови или моче специфического ДНК еще не говорит об отсутствии туберкулеза у больного.

Важно. При диагностике туберкулеза у детей чувствительность анализа ПЦР ниже, чем у взрослых, и составляет около 25-83%

Фото 1. Делать ПЦР вместо Манту ребенку, это хороший вариант, если он аллергик или часто болеет.

Показания для выявления туберкулза с помощью ПЦР анализа

ПЦР диагностика туберкулёза проводится чаще всего в спорных случаях. Когда врачи направляют на это исследование?

1. Если сложно поставить диагноз обычными доступными методами, но был контакт с больным туберкулёзом.
2. В случае, когда человека невозможно доставить на исследование в поликлинику для прохождения рутинных привычных исследований на туберкулёз, его легче обследовать с помощью ПЦР, так как мокроту для исследования можно доставить в баночке, а диагноз подтверждается в течение нескольких часов.
3. Если человеку предстоит экстренная операция и нужно срочно выяснить болен ли он туберкулёзом.
4. При необходимости беременную женщину тоже лучше обследовать на туберкулёз с помощью ПЦР, так как метод безопасен.
5. На платной основе диагностику может пройти каждый, у кого туберкулёз не был подтверждён с помощью бактериологических методов и рентгеноскопии. Такое бывает, когда очаг в лёгких незаметен на прямом снимке, а человек при сдаче мокроты на исследование не смог соблюсти рекомендации по правильному забору материала. При этом человека беспокоят все симптомы, характерные для туберкулёза лёгких.
6. Когда есть сомнения в результатах пробы Манту.
7. Предпочтительнее делать ПЦР диагностику туберкулёза у детей. Процедура безопасна, не создаёт дополнительную лучевую нагрузку, эффективна в отношении обнаружения сложных для диагностики форм заболевания.

Своевременная диагностика туберкулёза — это залог правильно назначенного лечения и снижения распространения заболевания. Часто знакомые методы выявления болезни не всегда эффективны. Поэтому ПЦР на сегодня является одним из самых достоверных и безопасных способов обнаружения инфекции на ранних этапах её развития.

В чем заключается анализ

Диагностика методом ПЦР заключается в получении сегментов патогенной ДНК из биологического материала и выстраивание их в правильную цепочку. Это позволяет идентифицировать микроорганизм, которому принадлежат клетки.

Процедура проводится в три этапа:

1. Сбор биологического материала.
2. Выявление и выстраивание ДНК.
3. Распознавание инфекции.

Для этого исследования требуется специальное медицинское оборудование – амплификатор. Он оснащен камерой, где исследуемый материал взаимодействует с высокой температурой и химическими ферментами. На выходе лаборант имеет длинную цепочку ДНК возбудителя болезни, если таковой имеется в организме человека.

Общие сведения о Манту

Манту – это проба, которую проводят с помощью подкожного введения малых дозировок туберкулина для проверки наличия у человека заболевания туберкулез или же предрасположенности к нему. Туберкулином называется антиген-вытяжка из бактерий туберкулеза. То есть проба Манту — это анализ на антитела к туберкулезу.

Чаще всего данную пробу проводят, чтобы проверить есть ли туберкулез у детей дошкольного и школьного возрастов.

Это исследование не является прививкой, как думают многие, так как она не создает иммунитет организма к бактериям туберкулеза, а проверяют его наличие. После проведения в месте прокола проявляется припухлость. По прошествии 3 дней результат анализируется. При этом специалист осматривает место прокола, оценивает характер уплотнения: цвет, размер и рисунок

Важно, чтобы человек соблюдал определенные правила ухода в эти дни. Самым важным является то, что уплотнение нельзя мочить и т.д

Если уплотнение от 4 до 16 мм, то это считается нормой. Показатель при туберкулезе легких – это 17 мм и больше. Но уже доказано, что часто проявляются ложные результаты. Поэтому все популярнее стает ПЦР анализ вместо Манту. Иногда назначают совместную диагностику, то есть нужно сдавать кровь после Манту.

Обязательно ли делать ПЦР при туберкулезе

Непосредственно всем пациентам с подозрением на ТВЦ проведение цепной диагностики не делается, так как процедура требует использования дорогого оборудования. Не все лечебные государственные учреждения позволяют его приобрести, тем более, что привычные методики диагностирования на микобактерии туберкулеза тоже информативны.

Сюда относят:

• Тщательное собирание анамнеза, опрашивание больного;
• Внешний осмотр;
• Туберкулиновая проба Манту;
• Рентгенографическое либо флюорографическое обследование;
• По надобности компьютерное диагностирование;
• Микроскопическое или бактериологическое исследование маска с мокротой.

ПЦР на туберкулез делается исключительно тогда, когда не имеется возможности сделать другой инструментальный анализ либо в сложных для диагностики обстоятельствах.

Несмотря на то, что изобрели великое множество методов диагностирования, количество больных туберкулезом продолжает расти. Кроме того заболеваемость приобрела некоторые особенности: нередко наблюдается тяжелая форма недуга, увеличивается число летальных исходов, возбудитель приобретает устойчивость имеющимся химиопрепаратам.

Многие люди не желают каждый год проходить профилактический осмотр, отказываются от вакцинации, что ведет к увеличению заболеваемости. Такие обстоятельства требуют эффективных и информативных способов исследования, доступных для взрослых и детей с диагнозом tbc. ПЦР имеет преимущества перед другими диагностическими методиками.

Последовательность выполнения теста

Диагностика туберкулеза у детей и взрослых при помощи полимерной цепной реакции проходит следующие этапы:

1. В определенных ситуациях берется различный материал на исследование. Это может быть кровь, мокрота или промывная жидкость из бронхов.
2. После этого взятый биологический материал в течение определенного времени (чаще всего это несколько минут) подвергают воздействию высоких температур (до +97°С). В результате разрушается первоначальная структура ДНК микроорганизма, которая состоит из 2 цепей.
3. После этого температура начинает снижаться, это действие называется отжигом. В это время праймер соединяется с 1 из разъединенных цепей.
4. В завершение проводится элонгация. Во время нее происходит необходимый биологический синтез существующих молекул.

Понадобится 25-30 циклов, чтобы получилось необходимое количество копий ДНК на микобактерии туберкулеза.

Для процедуры необходимо дорогостоящее оборудование, поэтому не во всех медицинских учреждениях имеется возможность проводить тест ПЦР на туберкулез вместо Манту.

Благодаря прививкам и исследованию ПЦР (вместо Манту) можно предотвратить развитие такого опасного недуга, как туберкулез. Теперь не понадобится дожидаться начала проявления болезни или делать снимки на рентгеновском аппарате. Если появляются подозрения на инфицирование, для исключения страшных последствий болезни всегда можно сделать тест ПЦР, который с максимальной точностью определяет состояние организма. В условиях реального времени такие формы диагностики, как проба Манту и флюорография, постепенно отходят на второй план по сравнению с методом ПЦР.

Недостатки анализа крови ПЦР

Кроме преимуществ у этого метода есть ряд недостатков, которые могут быть препятствием для проведения анализа ПЦР:

1. Относительная дороговизна процедуры. Для проведения такого анализа необходимо дорогостоящее оборудование и не каждая клиника может себе это позволить. Оно есть в крупных лабораториях частных компаний. Цены там, как правило, всегда высокие.
2. Анализ дает правильный результат лишь в том случае, если материал для исследования правильно подобран. К примеру, при туберкулезе мочеполовой системы, исследование крови наличие заболевания не покажет. В этом случае нужно собрать мочу или выделения из мочеполовых органов.
3. Метод не всегда дает точного результата у детей. Это объясняется влиянием прививок. Например, после прививки БЦЖ делать этот анализ не рекомендуется.
4. Есть вероятность получения ложноположительного или ложноотрицательного результата. Что это такое? Способ обладает очень высокой чувствительностью. При сборе материала должна соблюдаться повышенная стерильность. В случае если в материал попадет самое малое количество посторонних бактерий, анализ будет испорчен, результат исказится.

Несмотря на недостатки, метод достаточно широко используется. Например, в тех случаях, когда необходимо срочно определить заболевание у пациента. Его могут назначить беременным при подозрении на инфекцию, способную угрожать ребенку или матери. Иногда назначают детям перед принятием в детский сад. Но это по желанию родителей.

Разновидность медицинских анализов на туберкулез

Сдать необходимый анализ можно двумя способами: взять кровь или слюну у человека или произвести забор мокроты.

Анализ крови методом ПЦР может быть двух видов: ИФА и ПЦР. Такое исследование помогает следить за эффективностью медицинского лечения.

Иммуноферментный анализ крови помогает найти в организме человека антитела противостоящие микробам туберкулеза. Такое исследование проводиться один раз в течение суток. Главный минус – это его низкая чувствительность, что позволяет определить только заболевание с низким уровнем зараженностью.

Самым популярным и эффективным исследованием является анализ на микобактерии туберкулеза. С помощью нее врачи легко могут найти ДНК бактерий в крови человека. Такой метод используют так же и для определения количества бактерий, для контроля над лечением пациента, для выявления раннего рецидива.

ПЦР слюны является одним из самых современных способов исследования. Такой анализ поможет выявить в слюне инфекционные бактерии. С помощью ПЦР увеличивают число фрагментов ДНК вредных микробов.

Культуральный метод предназначен для обследования мокроты человека, для обнаружения микробактерий.

Что подразумевает ПЦР

В медицинской практике уже давно используются методы диагностики того или иного недуга путём обнаружения его ДНК или РНК в человеческом организме. Именно это и представляет собой ПЦР на туберкулёз. Это высокоточный анализ крови или другой биологической жидкости, который позволяет выявить бактерии при минимальной их концентрации в отобранном материале, достаточно единичной клетки. Исследование проводится с помощью специального фермента полимеразы.

Преимущества метода

ПЦР — это метод диагностики показал себя с наилучшей стороны, поэтому применяется он довольно часто, как в комплексе с другими способами, так и самостоятельно. Его преимущества:

• кратчайшие сроки изготовления. Исследование проводится быстро, примерно за 5 часов в помощью ПЦР можно обнаружить наличие бациллы туберкулёза в биологической жидкости пациента. Это особенно актуально, если нужно провести немедленное оперативное вмешательство, а перед этим получить точный диагноз;
• бывает, что другие методы диагностики противопоказаны пациенту. Например, рентгенографию можно делать далеко не всем. К тому же по снимку не всегда можно поставить диагноз, особенно если болезнь находится на ранней стадии. С помощь метода ПЦР возбудитель выявляется сразу же;
• для анализа подходит любая биологическая жидкость пациента. ПЦР мочи и слюны на туберкулёз проводится для выявления лёгочных и внелёгочных форм. Также исследование проводится и с использованием спинномозговой жидкости больного для выявления туберкулёзного менингита.
• метод абсолютно безопасен. Для его проведения достаточно получить биологическую жидкость из организма пациента. ПЦР диагностика туберкулёза у детей – это удобно и безвредно, так как флюорографическое обследование разрешено делать лишь с 18 лет, а проба Манту иногда вызывает побочные реакции;
• ПЦР – это высокочувствительный анализ. Он позволяет выявить палочку Коха при минимальной концентрации микобактерий;
• с помощью особого фермента полимеразы недуг диагностируется на любой стадии – от ранней до запущенной;
• данный метод эффективен при диагностике рецидива болезни;
• этот метод – прорыв в постановке точных диагнозов на ранних стадиях заболевания. Это позволяет начать лечение в кратчайшие сроки и уничтожить болезнетворные микроорганизмы, когда они ещё не успели оказать необратимое негативное влияние на органы и системы человеческого организма.

Где сделать анализ ПЦР на туберкулёз

Несмотря на то, что анализ ПЦР на туберкулёз – это высокоэффективный метод диагностики этого недуга, он редко используется самостоятельно. Как правило, это дополнительный способ обнаружения туберкулёза и используется он нечасто. Дело в том, что этот метод довольно дорогостоящий.

Государственные клиники не имеют возможности приобрести специальное оборудование для проведения анализа ПЦР, а правительство не видит смысла в финансировании этой статьи, так как туберкулёз можно диагностировать и другими способами. Такое исследование чаще всего проводится именно в частных клиниках, которые могут себе позволить приобрести необходимую аппаратуру.

Недостатки метода

Высокая цена – это не единственный недостаток ПЦР. Кроме дороговизны, у метода есть другие минусы и недочёты, например:

• ПЦР на туберкулёз даёт положительный результат даже после лечения, так как принимает мёртвые клетки за живые бактерии, поэтому данный метод не подходит в качестве контрольного обследования пациента для подтверждения его выздоровления;
• бациллы туберкулёза мутируют, а их ДНК видоизменяется, что может повлиять на достоверность результата;
• анализ крови ПЦР на туберкулёз осуществляется редко, так как присутствие палочки Коха в этих биологических жидкостях обнаружить крайне сложно. Это возможно только на последних стадиях или при сепсисе. Обычно для диагностики берётся мокрота больного;

Стоит отметить, что наиболее точный результат даёт именно забор содержимого желудка пациента. Если подозревается туберкулёз лёгких, то посев мокроты будет самым эффективным способом диагностики заболевания. Если же у больного внелёгочная форма, то в этой биосреде бактерий может не быть. Для определения туберкулёза костей, суставов и др. с помощью ПЦР нужна другая биологическая жидкость, например, спинномозговая.

Порядок проведения анализа ПЦР

Процедура проведения анализа ПЦР проводится посредством специального прибора под названием амплификатор, и состоит из четырех этапов. Для проведения исследования необходимы участки ДНК, с которых начинается синтез молекул, нуклеотиды (основы молекул ДНК), а также полимераза, или фермент, ускоряющий проведение процедуры.

1. Забор биологического материала (мокрота, кровь, смывы бронхов).
2. Прогревание образца до температуры около 98% для разрушения первичной структуры цепочки ДНК.
3. Отжиг, или снижение температуры на несколько градусов, чтобы связать праймер с нитью ДНК.
4. Синтез молекул, необходимых для получения результата.

После проведения 25-30 подобных циклов образуется определенное количество копий ДНК вирусов, по которым легко определить возбудителя заболевания.

Внимание: анализ ПЦР не отличает «мертвые» микроорганизмы от «живых», поэтому результат может быть положительным в течение определенного времени после проведенного лечения. .
К содержанию ↑

К содержанию ↑

Подготовка к анализу

Если сдается анализ крови ПЦР на туберкулез, то нет необходимости в специальной подготовке, но больным рекомендуется придерживаться общих правил: воздержаться от приема пищи не менее чем на 8 часов, исключить алкоголь и прием медикаментозных препаратов, не курить в течение часа перед забором материала.

Мокроту собирают в утреннее время после чистки зубов и тщательного полоскания полости рта.

Если экссудат выделяется плохо, накануне вечером следует принять отхаркивающий препарат или сделать ингаляцию. Диагностическую ценность имеет мокрота со слизью, гноем, белыми или желтоватыми вкраплениями.

Если взять мокроту на анализ невозможно, для выявления возбудителей заболевания используются смывы из бронхов. Такой анализ не требует подготовки, а забор материала выполняется следующим образом. С помощью гортанного шприца больному вливают в трахею раствор хлорида натрия, который вызывает сильный кашель — выкашлянная жидкость используется для исследования.

Внимание. Результат анализа искажают антибиотики, гепарин и другие препараты, использующиеся для местного лечения, поэтому исследование рекомендуется проводить через 10-14 дней после приема.

К содержанию ↑

Что нужно для точного результата?

Результат анализа ПЦР на туберкулез во многом зависит от условий транспортировки и хранения пробы, а также от течения заболевания. Забор материала в период ремиссии хронического заболевания может дать ложноотрицательный результат из-за подавления возбудителей клетками иммунной системы.

Не рекомендуется сдавать биологические жидкости и проводить анализ вне стен лаборатории, так как это может привести к загрязнению пробы и искажению результата. Немаловажную роль играет и соблюдение температурного режима при длительном хранении образцов — кровь перед анализом ПЦР нельзя замораживать.

Для справки. Объем биологического материала для анализа не должен быть избыточным, так как вместе с микроорганизмами в него попадают вещества, которые способны разрушить цепочку ДНК.

К содержанию ↑

Интерпретация результатов

Результат исследования при анализе на ПЦР туберкулез, может расшифровываться двумя способами: простым и сложным. Простая интерпретация выдается в значениях «обнаружено» и «не обнаружено» (положительно или отрицательно).

1. Положительный результат обычно выглядит следующим образом: инфицирование микроорганизмами Mycobacterium tuberculosis.
2. Ложноположительный результат: обнаружены нежизнеспособные фрагменты ДНК микобактерий.
3. Отрицательный результат: Mycobacterium tuberculosi не обнаружены, обнаружено недостаточное количество детектируемых частиц.

Кроме того, при положительном результате часто используется сложная расшифровка, определяющая стадию и очаг заболевания. Интерпретировать результаты анализа в данном случае может только врач.

Как производится забор крови методом ПЦР

Чтобы сдать кровь на анализ, больной должен не принимать пищу более шести часов. Лучше всего проходить процедуру утром натощак. Кровь забирается из локтевой вены через одноразовую иглу сразу в стерильную пробирку. Туда же вводится антикоагулянт, чтобы кровь не свернулась

Смешивать содержимое пробирки следует осторожно, не допуская резких движений.

Если кровь была взята вне лаборатории, ее надо немедленно доставить лаборанту. Для проведения анализа на туберкулез она должна храниться не более пяти часов. По истечении этого времени результат может быть неточным. Взятие материала вне лаборатории допускается только в том случае, если пациент не может приехать в больницу по состоянию здоровья. Например, он лежачий, и нет возможности нанять соответствующий транспорт.

Подводя итоги

В завершение можно сделать следующие выводы:

• ПЦР – это высокоточный анализ, который позволяет выявить туберкулёз спустя несколько дней после заражения;
• этот анализ делается за 3,5 – 5 часов, поэтому в случае, когда счёт идёт на часы, он незаменим;
• это безопасный метод, который не имеет побочных действий;
• его применяют, когда другие способы диагностики показали противоречивые результаты или же их применение противопоказано.

Тем не менее ПЦР делается редко, так как это дорогостоящий анализ, который требует установки специального оборудования. Кроме того, он не всегда информативен, поэтому специалисты используют этот способ выявления туберкулёза, как дополнительный.