Определение групп крови с помощью цоликлонов анти-А и анти-В.

Что это за метод?

Прежде всего необходимо разобраться, что же представляет собой метод определения группы крови при помощи цоликлонов. И здесь мы сразу же сталкиваемся с новым словом, которое, скорее всего, ранее не слышали.

Цоликлоны, что это такое? Это специальный раствор антител, который связывается на поверхности эритроцитов с антигенами. Таким образом, происходит биохимическая реакция, в ходе которой врачи могут узнавать всю необходимую информацию по поводу группы крови или резус-фактора пациента.

Преимущество метода с цоликлонами в том, что в отличии от такового с сыворотками, с его помощью можно сразу же узнать и резус-фактор.

Стоит сразу отметить, что существует несколько разновидностей цоликлонов:

• анти – А (представлен красной жидкостью);
• анти – В (синяя жидкость);
• анти – D (прозрачная жидкость).

Первые два цоликлона необходимы для определения группы крови. А вот третий, представленный в этом списке помогает определиться с резус-фактором. Данные разновидности цоликлонов выпускаются в небольших прозрачных флаконах, объем которых составляет 5 или 10 миллилитров.

Хранить его можно на протяжении двух лет в темном, недоступном для детей месте. Приобрести такой флакончик можно практически в любой аптеке, при необходимости можно заказать его на складе.

Помните о том, что при определении группы крови и резус – фактора ни в коем случае нельзя смешивать данные цоликлоны. Брать их необходимо разными пипетками, обычно каждый из них продается с отдельной пипеткой. В случае, если вы смешаете цоликлоны, то группа крови будет определена неправильно и вам нужно будет еще раз повторить процедуру.

Группа крови и резус-фактор

Узнайте больше о популярных анализах:

Что можно и нельзя перед анализом крови?

Как расшифровать общий и биохимический анализы крови?

Анализ крови у женщин и у мужчин — нормы и отличия

Эритроциты человека, как и другие клетки органов и тканей, имеют на своей поверхности антигены (агглютиногены). Антигены эритроцитов обладают способностью взаимодействовать с антителами (агглютининами) и образовывать комплексы антиген-антитело. В настоящее время выявлено около 400 эритроцитарных антигенов, которые распределены по 29 системам групп крови.

Для каждого человека характерен свой набор этих антигенов, представленный на мембране эритроцитов, который называется фенотипом. Чтобы определить набор этих антигенов и необходимо сдать кровь и провести анализ на группу крови. Совокупность антигенов, унаследованных от одного из родителей, носит название гаплотипа. По фенотипу нельзя судить о составе гаплотипов. Гаплотип можно установить лишь при анализе наследования генов в семье. Достаточно большое разнообразие антигенов эритроцитов свидетельствует о том, что абсолютно идентичных гемокомпонентов практически не бывает, поэтому любая аллогенная трансфузия эритроцитсодержащих сред может сопровождаться сенсибилизацией реципиента теми или иными антигенами донора. Взаимодействие образовавшихся в результате этого процесса антител к антигенам эритроцитов ведет к сокращению времени жизни перелитых эритроцитов, а в некоторых случаях к гемолитическим посттрансфузионным реакциям и осложнениям. Поэтому назначение любого вида гемокомпонентной терапии должно сопровождаться соответствующими иммуногематологическими исследованиями, как крови доноров, так и реципиентов гемокомпонентов, в ходе которых выявляются эти антитела и не допускается переливание соответствующего им антигена.

Невозможность исследования всего спектра антигенов диктует ограничения для иммуногематологической апробации крови доноров и реципиентов, которая включает только те антигены, клиническим значением которых обусловлена безопасность гемокомпонентной терапии. Прежде всего, это антигены эритроцитов, несовместимость по которым может стать причиной серьёзных гемолитических посттрансфузионных реакций и осложнений. В настоящее время шкала приоритета трансфузионно опасных эритроцитарных антигенов выглядит следующим образом: А,В>D>K>c>C>E>e. Широкое типирование антигенов эритроцитов для реципиентов гемокомпонентов не требуется. В норме к антигенам всех эритроцитарных систем, за исключением системы АВО, антител быть не должно. В первую очередь совместимость при переливании крови должна быть обеспечена правильным выбором донора по группам крови системы AB0 и резус-фактору.

Для определения группы крови необходимо сдать анализ на группу крови. Система AB0 (определение группы крови) является одной из основных систем антигенов эритроцитов, у людей известны 4 группы крови по системе AB0, которые определяются наследованием или не наследованием эритроцитарных антигенов А и В. Антигены системы AB0 формируются на эритроцитах ещё до рождения ребёнка, однако окончательное созревание антигенов происходит только через несколько месяцев после рождения. Характерной особенностью для системы антигенов AB0 является врождённое постоянное присутствие в сыворотке крови людей (кроме лиц с группой крови AB(IV)) антител к антигенам А и В. Антитела к антигенам эритроцитов других систем не являются врождёнными и вырабатываются в ответ на попадание этих антигенов в организм при переливании крови или во время беременности. Иммунологическая характеристика групп крови по системе AB0 приведена в таблице 1.

Таблица 1. Определение группы крови по системе AB0

Частота встречаемости групп крови в популяции: 0 (I) – 33,5%; A (II) – 37,8%; B (III) – 20,6%; AB (IV) – 8,1%.

Система антигенов резус (RH-антигенов) включает 5 основных антигенов: C, c, D, E и е. Её название обусловлено тем, что впервые данный антиген был выявлен у макак резус. Определение RH-антигена (резус-фактора) имеет важное значение при переливании крови. Основное значение имеет D-антиген. Около 85% населения нашей страны имеют D-антиген на эритроцитах, данные лица относятся к резус — положительным и около 15% не имеют D-антигена (резус-отрицательные). Антиген D обладает выраженными иммуногенными свойствами, он в 95% случаев является причиной гемолитической болезни новорожденных при несовместимости крови матери и плода, а также частой причиной тяжёлых пострансфузионных осложнений.

Расшифровка полученных данных

Техника определения группы крови с помощью цоликлонов считается достоверной, и результат можно получить в кратчайший срок. Таблица прохождения агглютинации позволяет понять, как правильно расшифровать полученную в процессе процедуры информацию.

Если ни с одним из используемых в процессе процедуры реагентов агглютинация не произошла, для анализа была получена кровь первой группы, в которой нет антигенов А или В.

Если в процессе смешивания исследуемой массы с цоликлонами анти-А произошло склеивание, речь идет о второй группе крови, в которой содержатся антигены А.

Склеивание цоликлонов анти-В с компонентами крови при смешивании их с кровью пациента свидетельствует о том, что для процедуры сдана кровь третьей группы, в которой содержатся антигены В.

Если произошла агглютинация фрагментов крови с обоими видами реагентов, скорее всего, манипуляция проводится с участием четвертой группы. Для подтверждения данного предположения применяется специальный цоликлон анти-АВ.

Что следует учитывать при проведении анализа?

Чтобы результат анализа был максимально достоверным, при проведении процедуры необходимо соблюдать ряд условий:

• реагенты должны храниться в холодном месте при температуре +2-8 градусов во флаконах с плотно закрученной крышкой (в случае нарушения правил хранения они быстро теряют свои свойства);
• для проведения анализа нельзя использовать цоликлоны с истекшим сроком хранения (он составляет около 30 дней) или жидкости, которые содержат осадок, хлопья или мусор;
• исследование выполняется в хорошо освещенном помещении при температуре воздуха не ниже +15 и не выше +25 градусов, причем в нем не должно быть грязи, пыли и других факторов, способных исказить результат;

  Температура воздуха во время процедуры должна соответствовать

• при нанесении биоматериала и реагентов на поверхность планшетки следует точно соблюдать пропорции – если крови будет слишком много, реакцию сложнее отследить, а в противоположном случае (при малом объеме) она будет слишком медленной;
• нельзя допускать, чтобы капли крови, смешанные с разными типами цоликлонов, сливались вместе – если это случилось, исследование проводят заново; по этой же причине для смешивания реагентов с биоматериалом следует использовать разные палочки.

Процесс определения группы крови

Продолжительность реакции должна составлять не менее 3 минут, а при сомнительном результате время наблюдения за образцами биоматериала следует продлить до 5 минут. Однако по истечении 10 минут может произойти подсыхание биоматериала и естественное выпадение эритроцитов в осадок, поэтому доверять такому исследованию не стоит.